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血清/血浆核酸纯化试剂盒QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit

  • 更新时间:  2017-02-08
  • 产品型号:  qiagen 55114
  • 简单描述
  • qiagen血清/血浆核酸纯化试剂盒QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit
    中文名称:qiagen血清/血浆核酸纯化试剂盒
    英文名称:QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit
    现货供应
详细介绍

qiagen血清/血浆核酸纯化试剂盒QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit

从人类血浆或血清中浓缩和纯化游离DNA和RNA

  • 浓缩的核酸,高上样量,低洗脱体积
  • 高效回收DNA和RNA碎片
  • 无需有机提取或乙醇沉淀
  • 完全去除污染物和抑制剂

QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit大大简化了从血浆或血清中浓缩和纯化游离DNA和RNA的过程。

qiagen血清/血浆核酸纯化试剂盒QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit

回收游离DNA。

在24个血浆样本中加入同等量的DNA片段(200 bp和1000 bp)。使用QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit从5 ml血浆中纯化DNA,洗脱体积为80 μl。使用QuantiTect Multiplex PCR Kit对每个DNA片段特异性的66 bp靶点进行双重real-time PCR,定量DNA的产量。

回收片段化DNA,表现更出色。

使用QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit从5 ml血浆中纯化游离DNA,或者使用QIAamp MinElute Virus Vacuum Kit从200 μl血浆中纯化游离DNA,洗脱体积为100 μl。使用QuantTect Multiplex PCR Kit对18S rRNA基因内的66 bp扩增片段和500 bp扩增片段进行双重real-time PCR,定量DNA的产量。500 bp扩增片段和66 bp扩增片段的扩增差异显示DNA被片段化,从而导致完整的500 bp目标序列的丰度低于较短的66 bp靶点。(请注意差异大于五倍样本输入体积差异)。

高效纯化游离miRNA。

使用QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit从4 ml采集血浆中纯化游离DNA,洗脱体积为50 μl。将标准试剂盒实验方案与适用于miRNA的实验方案进行比较。使用TaqMan microRNA Assay(Applied Biosystems)定量miRNA 30b的产量,使用Human miScript Assay(QIAGEN)定量miRNA 16的产量。采用miRNA实验方案获得的CT值较低,表示miRNA的产量更高。

高效回收甲基化DNA。

使用QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit从4 ml血浆中纯化加入的甲基化DNA和非目标poly-A RNA,洗脱体积为45 μl。使用EpiTect Bisulfite Kit(QIAGEN)进行亚硫酸氢盐转化,使用real-time MSP分析和QuantiTect Multiplex PCR Kit组分在ABI PRISM 7900HT Sequence Detection System上进行甲基化特异性PCR(MSP)。对两个全甲基化位点数据进行分析。

qiagen

erformance

分析血液中肿瘤特异性的胞外DNA片段和mRNA可对普通血液样品进行特异性地肿瘤类型检测。这些存在于血清或血浆中的游离核酸通常都是<1000 bp(DNA)或<1000 nt(RNA)的片段。此外,小至21 nt的miRNAs可作为某些癌症和疾病状态的生物标记。

QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit可从人类血浆、血清和其他无细胞体液中高效纯化游离核酸。纯化效率高、重现性好、产量高(参见"Reproducible recovery of circulating DNA")。应用延长的上样管和真空装置QIAvac 24 Plus可将样品处理量提至5 ml,洗脱体积可在20–150 μl之间灵活变化,可浓缩低浓度核酸。 该试剂盒采用先进的技术,硅胶膜选择性的结合目标核酸,提高片段化核酸的回收率(参见"Improved recovery of fragmented DNA")。

使用RNase-Free DNase Set进行DNA柱上消化,纯化获得不含DNA的游离RNA 。特别设计的流程确保高效纯化诸如miRNA等小RNA(参见"Efficient purification of circulating miRNA")。使用QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit高效纯化甲基化DNA,经纯化的DNA维持其甲基化状态,可进行亚硫酸氢盐转化实验,进行甲基化状态分析(参见"Efficient recovery of methylated DNA")。

经纯化和浓缩的游离DNA和RNA不含蛋白、核酸酶和其他杂质,可即用于各种下游应用,包括:

PCR 和定量real-time PCR以及RT-PCR

用于基于血液样品的癌症生物标记的研究、验证和检测

病毒核酸检测 

 


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