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总结hyclone胎牛血清正确存放与解冻的方法
浏览次数:136发布日期:2022-03-23
  hyclone胎牛血清富含蛋白、生长因子、氨基酸、脂类、碳水化合物、维生素、微量元素等成分,是体外细胞培养所需的重要营养物质之一,也是抗体药研发人员经常使用的原料试剂,其血源和生产工艺决定了最终产品的品质和性能。
 
  hyclone胎牛血清的正确存放与解冻是各位实验家尤为关注的一个问题,经过专业人员从其成分中分析,在保证质量的前提下,正确存放与解冻的方法,总结如下:
 
  1)保存血清较好的方法?
 
  我们建议血清应保存在-5℃至-20℃。然而,若存放于4℃时,请勿超过一个月。若您一次无法用完一瓶,建议您无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。
 
  2)如何解冻血清才不会使产品质量受损?
 
  我们建议您将血清从冷冻箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室温下使之全融。但必须注意的是,融解过程中必须规则地摇晃均匀。
 
  3)血清解冻后发现有絮状沉淀物出现,该如何处理?
 
  血清中沉淀物的出现有许多种原因,但较普遍的原因是由于血清中脂蛋白的变性所造成,而血纤维蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解冻后,也会存在于血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一。但少量这些絮状沉淀物,并不影响血清本身的质量。
 
  若您欲去除这些絮状沉淀物,可以将血清分装至无菌离心管内,以400g稍微离心,上清液即可接着加入培养基内一起过滤。我们不建议您以过滤的方法去除这些絮状沉淀物,因为它可能会阻塞您的过滤膜。
 
  4)为什么要热灭活血清?
 
  加热可以灭活补体系统。激活的补体参与溶解细胞事件,刺激平滑肌收缩,细胞和血小板释放组胺,激活淋巴细胞和巨噬细胞。在免疫学研究,培养ES细胞,昆虫细胞和平滑肌细胞时,推荐使用热灭活血清。
 
  5)有必要做热灭活吗?
 
  实验显示,经过正确处理的热灭活血清,对大多数的细胞而言是不需要的。经此处理过的血清对细胞的生长只有微小的促进,或完全没有任何作用,甚至通常因为高温处理影响了血清的质量,而造成细胞生长速率的降低。而经过热处理的血清,沉淀物的形成会显著的增多,这些沉淀物在倒置显微镜下观察,像是“小黑点”,常常会让研究者误以为是血清遭受污染,而把血清放在37℃环境中,又会使此沉淀物更增多,使研究者误认为是微生物的分裂扩增。因此我们建议您,若非必须,您可以不需要做热处理这一步。如此一来,不但节省您宝贵的时间,更确保血清的质量!
 
  6)为什么储存在冰箱中的胎牛血清会出现少量沉淀?
 
  hyclone胎牛血清没有预老化,储存在2-8℃时,血清中的各种蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可见的混浊。这应该不会影响血清的质量。推荐在-20℃储存胎牛血清,避免反复冻融。
 
  7)如何避免沉淀物的产生?
 
  我们建议您在使用血清的时候,注意下列的操作:
 
  解冻血清时请按照所建议的逐步解冻法(-20℃至4℃至室温),若血清解冻时改变的温度太大(如-20℃至37℃),实验显示非常容易产生沉淀物。解冻血清时请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生。
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