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血液DNA提取试剂盒实验前准备及注意事项说明
浏览次数:1279发布日期:2021-01-22
  血液是与所有器官都有接触的组织,蕴藏着大量宝贵信息。早前人们开发了血液活检技术。用来分析循环肿瘤DNA、检测血液中完整的肿瘤细胞和收集由肿瘤细胞释放出的外泌体。还可以分析血液样本中的肿瘤DNA,并对癌症的基因特点进行检测。随着基因测序技术的快速发展,血液活检技术以其迅速、便捷、损伤性小等优点已经逐步应用于临床。用来监测肿瘤的术后反应,预测肿瘤复发。还能够协助医生发现患者的无任何症状的早期肿瘤。
 
  血液DNA提取试剂盒可从新鲜或冷冻的抗凝血中提取人类的或哺乳动物的基因组DNA。整个提取过程不涉及酚等试剂,提取的血液基因组片段大,纯度高,质量稳定可靠,配合高通量的全自动核酸提取仪,可实现DNA的自动化提取。
 
  血液DNA提取试剂盒在操作的时候,无需加热,室温(15-25℃)下即可进行全程操作,提取结果可用于各种常规操作,包括酶切、PCR、荧光定量PCR、文库构建、Southern杂交,芯片检测、高通量测序等实验。
 
  实验前准备及重要注意事项:
 
  1、向蛋白酶K中加入用量(0.3ml/1.25ml)的蛋白酶K储存液使其溶解,-20℃保存。配制好的蛋白酶K勿长时间室温放置,避免反复冻融,以免影响其活性。
 
  2、所有离心操作均在室温下完成。
 
  3、血液样品反复冻融,会导致提取的DNA的片段较小且提取量下降。所得基因组DNA也应尽可能避免反复冻融,以免降解。如果提取冷冻血液的基因组DNA,建议37℃水浴,迅速解冻后再进行后续操作。
 
  4、血液样品的储存:
 
  1)短期保存:已加入抗凝剂的血液样品可在2~8℃储存到10天,对于某些实验例如Southern杂交等,需要得到完整全长的基因组DNA,请将血液样品在2~8℃储存不超过3天,此时基因组DNA的降解程度较轻。
 
  2)长期保存:已加入抗凝剂的血液请置于-70℃保存(如果提取的是高分子量的DNA,推荐使用EDTA作为抗凝剂)。
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